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Laboratorio PB

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Laboratorio de Pruebas Biológicas

El Laboratorio de Pruebas Biológicas del Instituto de Química de la UNAM proporciona servicio de apoyo a la investigación con los diversos métodos de prueba que tiene estandarizados. El servicio está disponible para usuarios internos de la UNAM y para externos. El laboratorio cuenta con el equipo y personal capacitado que permite ofrecer un servicio de calidad en la obtención de los resultados. La M. en C. Ma. Teresa Ramírez Apan y el M. en C. Antonio Nieto Camacho son los Técnicos Académicos responsables de realizar los bioensayos y de apoyar al usuario del servicio en los aspectos estadísticos y de interpretación de resultados.

Equipo disponible e Infraestructura

  • Lector de Placas SYNERGY HT, BioTek.
  • Lavador de placas ELx405, BioTek
  • Campana de Flujo Laminar, ESCO
  • Incubadora de CO2, ESCO
  • Contador automatizado de células TC20, BIO-RAD
  • Centrífuga clínica 228, Fisher Scientific
  • Centrífuga refrigerada 5415R, Eppendorf
  • Balanza analítica BP61S, Sartorius
  • Microscopio óptico invertido DIAPHOT 300, Nikon
  • Potenciómetro 50 pH Meter, Beckman
  • Ultracongelador Ultima II, REVCO
  • Autoclave vertical, Boyer
  • El laboratorio cuenta con un bioterio para realizar las pruebas in vivo.

    Aplicaciones

  • Evaluar la inhibición del crecimiento de lineas de cáncer humano en cultivo.
  • Evaluar la capacidad de antioxidante de sustancias puras o mezclas.
  • Determinación de la actividad antiinflamatoria de extractos vegetales y compuestos químicos orgánicos e inorgánicos.
  • Todos los análisis que realiza el laboratorio son de tipo cuantitativo, para trámites ante instancias, gubernamentales y cumplir con los requisitos.
  • Determinación de la toxicidad aguda en ratones y crustáceos de compuestos y extractos.

Servicios que ofrecemos

  • Actividad citotóxica en líneas celulares cancerosas de humano siguiendo el protocolo de Sulforrodamina B descrito por el Instituto Nacional del Cáncer de los Estados Unidos de Norteamérica.
  • Viabilidad celular en cultivos celulares de cáncer humano y células sanas de acuerdo al protocolo de la ruptura de la sal de tetrazolio (MTT).
  • Toxicidad aguda en Artemia salina.
  • Actividad antiinflamatoria de compuestos de naturaleza esteroidal y no esteroidal mediante los siguientes modelos:
  • Edema inducido con la aplicación tópica de 13-acetato de 12-O-Tetradecanoil-forbol (TPA) en la oreja de ratón.
  • Cuantificación del contenido de la enzima mieloperoxidasa en biopsias de oreja de ratón inflamada.
  • Edema inducido con inyección de carragenina en la pata de ratón y rata.
  • Evaluación de actividad analgésica con los modelos de modelo de platina caliente (Hot-plate) y contracción abdominal inducida con ácido acético en ratón (Writhuing).
  • Actividad antioxidante:

    Cuantificación de la reducción del radical libre 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH).

    Inhibición de la peroxidación de lípidos inducida con FeSO4 o AAPH en homogeneizado de cerebro de rata.

  • Inhibición de la enzima alfa glucosidasa de levadura y de intestino de rata.
  • Toxicidad oral aguda con base en el protocolo de la OECD

    Responsables del Laboratorio

    Los técnicos académicos que colaboran en el laboratorio son: el M. en C. Ma. Teresa Ramírez Apan y el M. en C. Antonio Nieto Camacho son los Técnicos Académicos responsables de realizar los bioensayos y de apoyar al usuario del servicio en los aspectos estadísticos y de interpretación de resultados.

    Nota:

    Para los experimentos que involucran ratones, es responsabilidad del usuario proporcionar los animales.
Requisitos de la prueba/

  • Las pruebas que se realizan en dos etapas: cernimiento primario (una sola concentración) y curvas concentración - respuesta (4 a 6 concentraciones). Para las curvas concentración - respuesta es necesario hacer entre tres y cinco experimentos independientes para obtener la Concentración Inhibitoria 50 (CI50) ± ESM (error estándar de la media).
  • Para las muestras externas (STE, STA) que se someten a cernimiento primario el tiempo de entrega de resultados es de 3 a 4 semanas, debido a que se hacen al menos tres experimentos independientes para reportar la reproducibilidad de actividad de la muestra (Promedio ± ESM).
  • Para las muestras que se someten a curvas concentración - respuesta el Investigador deberá ser informado vía telefónica o por correo electrónico que los resultados finales de la IC50 se tendrán de 1 a 3 meses dependiendo del número de líneas celulares que se sometan para la IC50 y de la cantidad de muestras en espera.
Requisitos de las muestras

  • Con el objetivo de proporcionar un servicio satisfactorio se le solicita al usuario que sus muestras cumplan con los siguientes requisitos:
  • Para cernimiento primario se requiere entre 1 a 2 mg de muestra
  • Para la curva de concentración-respuesta que requieren 20 mg de la muestra
  • La solubilidad debe ser mayor o igual a 20 mg/mL para extractos o fracciones y de 20 mM para compuestos puros.
  • Para los experimentos de citotoxicidad la muestra debe ser soluble exclusivamente en dimetilsulfóxido, etanol, metanol o agua.
  • Para las demás pruebas la muestra deben ser completamente soluble en alguno de los siguientes disolventes: metanol, etanol, acetona, cloroformo, dimetilsulfóxido o agua.
  • El usuario es el responsable de pesar correctamente de la muestra y de la pureza de la misma. Para curvas concentración-respuesta la muestra debe ser del mismo lote con el que se solicitó el cernimiento.
  • El usuario debe garantizar que al pesar una muestra, la incertidumbre de la pesada sea menor o igual al 10%.
Características de pruebas

Para los experimentos de citotoxicidad la muestra debe ser soluble exclusivamente en dimetilsulfóxido, etanol, metanol o agua. Para las demás pruebas la muestra deben ser completamente soluble en alguno de los siguientes disolventes: metanol, etanol, acetona, cloroformo, dimetilsulfóxido o agua.

Tiempo de entrega

  • Actividad citotóxica y viabilidad celular.
  • Ensayo de cernimiento: 15 días hábiles.
  • Curvas concentración respuesta: 1 a 3 meses.
  • Las demás pruebas tienen un periodo de entrega entre 5 a 25 días hábiles.
  • Los tiempos de entrega son en condiciones normales de trabajo y pueden variar dependiendo de la carga de trabajo del laboratorio.
  • El tiempo de promesa de entrega de resultados empieza a correr el día que el usuario entrega los animales al personal de LPB. En el caso de muestras ingresadas por la Secretaria Técnica, ésta proveerá los animales.

Formato de resultados

  • Los resultados se entregaran en formato impreso o electrónico.

Atención a usuarios

Laboratorio Certificado

Nuestros laboratorios cuentan con un sistema de gestión de calidad bajo la Norma ISO 9001:2015, certificados por Certificación Mexicana S.C. y cuentan con el Reconocimiento de Calidad UNAM.

Más información...

Tiempo/ entrega

Los resultados se entregaran en formato impreso o electrónico. Nota: Para los experimentos que involucran ratones, es responsabilidad del usuario proporcionar los animales.

Contáctanos

Dr. Baldomero Esquivel Rodríguez/ Secretario Técnico.
correo:iqsectec@iquimica.unam.mx

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Preguntas frecuentes

En el siguiente link encontrarán las preguntas frecuentes:

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Nuestro equipo de trabajo

Nuestro personal tiene un alto nivel académico y está especializado en las técnicas analíticas.